采取口鼻拭子联合尾根血混样,或口鼻拭子联合腹股沟淋巴结穿 刺混样的检测采样方法,可提高病原检出率。同时还应当采集临床异常猪的前腔静脉血或尾静脉血,分离血清后进行非洲猪瘟病毒抗体检 测。 1.采样:使用聚丙烯材质拭子,避免使用头部为棉花制品的拭子、 含海藻酸钙拭子以及木柄拭子,防止棉花纤维对蛋白质吸附影响病毒 洗脱效果及抑制 PCR 反应的物质影响检测结果。 1.1 育肥猪群:猪场发现临床异常猪只后,立即对育肥猪群进行大 栏棉绳口腔液采样,及时送检进行病原检测。 1.2 产房:在母猪分娩后,采集脐带血、胎衣或胎衣液等样品以及 母猪口鼻拭子联合尾根血混样样品进行病原检测。 1.3 病死猪:在确保养殖场内生物安全的情况下,及时采集病死猪 淋巴结、肺脏等样品在当天送检。有研究报道非洲猪瘟病毒变异株在 猪淋巴结、肺脏病毒载量最高,采集相应组织样品进行检测,可提高 检出率。 1.4 环境:定期对猪场内料槽、风机等进行环境样品检测。国家非 洲猪瘟区域实验室(广州)研究发现,养殖场内料槽样品的病毒核酸 检出时间早于猪只出现异常临床症状的时间。 2.样品保存:样品保存管应使用无菌、对核酸无吸附作用的螺旋 盖塑料管。每个样品管应再套一个样品袋防止样品泄露和污染。新鲜 采集的临床标本应在 2~8℃条件下,在采集后 2~4h 内送至实验室。 3.病原检测方法:可采用非洲猪瘟病毒(P72/CD2v/MGF)三重实 时荧光定量 PCR 方法检测病毒核酸。对非常见基因变异且临床症状特 殊的病例,需进一步送相关实验室进行全基因组测序鉴别。